分離純化是農藥分析必不可少的過程,，不管是商品農藥樣品還是殘留農藥樣品都不是純的農藥成分,。
對于農藥樣品的分析,，首先要進行一定的分離純化步驟,，使農藥和雜質盡可能分離,，達到分析結果準確的目的。
不同的農藥樣品有不同的純化方法,。選擇分離方法的依據是樣品中農藥的性質和雜質的性質差別來選擇分離純化的方法
農藥分離的主要類別
原藥分析：各種農藥異構體及有效成分含量,。
殘留分析：土、水,、動植物體中農藥殘留量分析,。
原藥的一般組成
原藥（固體）：含填料，加工成粉劑,，可濕粉劑顆粒時加入,。
加入目的：原藥粉，不易粉碎,；農藥藥效高,單位面積用量少,，加入填料后易稀釋。
加入成分：藥石,、粘土,、碳酸鹽類。
原藥（液體）：含溶劑,、助劑,、乳化劑、非有效成分（合成副產物,、降解成分等）,。
原藥分析與殘留分析比較
原藥分析對象：主要對有效成分分析。
原藥分析的特點：含量高,，有固定的提純與分析方法,。
殘留分析對象：對人、畜,、環(huán)境有害成分,。
殘留分析特點：殘留量少,，組成復雜。要提取,、富集,，分離提純。分離提純與分析方法靈活多樣,。
共同點：基本原理和方法一致,。
分離提純（富集）——物理和化學方法；
分析類別：定性分析,、定量分析
固體農藥的純化方法簡介
固體農藥（有效成分）制標準樣時用重結晶法提純,。
提純原理：在某一種溶劑中，固體農藥的溶解度隨溫度變化有較大的變化,。在較高溫度時的飽和溶液趁熱過濾除不溶性雜質,。母液放冷，在較低溫度時農藥以晶體析出,，過濾,，可溶性雜質留在母液中而除去。
（可反復重結晶直到提純農藥熔點不變?yōu)橹梗?/span>
重結晶的關鍵因素
關鍵：選合適溶劑,。
重結晶溶劑具備條件：
a.不與被提純成分發(fā)生化學反應
b.被提純物與雜質要有顯著溶解度差
c.被提純物在該溶劑中溶解度隨溫度變化變化大
d.溶劑沸點適中（不高也不低）
如沒有合適的純溶劑則用混合溶劑重結晶,。
混合溶劑的選擇方法
1、確定兩種溶劑可以互相混溶,，而且一種是被提純農藥的良好溶劑,，一種是不良溶劑。
如乙醇和水,；苯和乙醇,；丙酮和三氯甲烷等。
2,、取0.02g—0.03g樣品溶解于一定量（1mL）的良好溶劑中（試管）,，然后在不斷搖動下緩慢滴加不良溶劑，直到出現(xiàn)渾濁為止
3,、記下不良溶劑的體積,，計算得到混合溶劑的組成比例，通過重復試驗進行適當調整
重結晶的一般操作步驟
1,、制成飽和熱溶液（接近溶劑的沸點）
2 熱過濾（除不溶雜質）
3,、自然冷卻結晶
4、過濾晶體與洗滌,。
5,、干燥
6、標準品多次重結晶，直到m.p 不變?yōu)橹?/span>
重結晶操作要點
1,、制成飽和熱溶液
視被提純物質多少選用適當容積的燒瓶,，將被提純物質放入燒瓶，裝好回流裝置,。
在不超過溶劑沸點的熱浴溫度下緩慢滴加溶劑,，并攪動，使溶質在接近容積沸點時剛好溶解,，立刻停止滴加溶劑
記下溶劑的體積與溶質的質量
2 （用保溫漏斗）熱過濾,。或者將熱的布氏漏斗和濾紙用熱溶劑潤濕后減壓過濾
3,、結晶：濾液自然冷卻結晶（易揮發(fā)溶劑或者易于吸潮的溶劑應密閉結晶）
如果冷至室溫不結晶,，則可以放入晶種或用玻棒擦容器器壁,；或放入冰箱進行結晶（注意冰箱溫度應該在溶劑凝固點之上）
4,、過濾與洗滌晶體：減壓過濾、用低溫,、少量溶劑洗滌
注意：減壓過濾應該在布氏漏斗完全沒有液滴滴下為止
5,、干燥
a、低熔點固體,、不吸潮物質,，可以在空氣中干燥
b、高熔點, 熱穩(wěn)定的物質用烘箱中干燥
c,、熱不穩(wěn)定,，或吸潮、空氣中不穩(wěn)定的物質,，低于m.p 20—30℃ ,，真空干燥
液體農藥 分離提純方法
1、蒸餾法
1）原理：依液體混合物中各組分沸點不同而分離,。
2）蒸餾方法分類：
常壓蒸餾適用于b.p較低,，在b.p時不分解的物質。
減壓蒸餾適用于b.p較高,，或在b.p發(fā)生分解的物質,。
水蒸氣蒸餾適用于不與水反應，b.p較高的物質,。
2,、柱層析法
1）原理：當混合物被束縛在色譜柱的固定相上后，流動相自上而下流經固定相,，帶動被分離組分向下移動,。與固定相作用力大的組分在流動過程中留在了后面，與固定相作用力小的組分在流動過程中跑在了前面，混合物因而被分離,。
2）柱層析分類：吸附,、分配、凝膠
吸附色譜柱：吸附劑固體表面吸附各種成分
分配色譜柱：惰性載體表面涂高沸點液體,，被分離物在淋洗劑與高沸點液體之間溶解分配
凝膠色譜柱：多凝膠填粒,、淋洗，凝膠網眼大小篩分不同尺寸的分子
3）柱色譜的幾種技術指標：
a.直徑與長度比：1：10~1：40（短而粗的柱子,，分離快,，分離效果差；長而細的柱子,，分離慢,，分離效果好。）
b.色譜柱的分離效果還與吸附劑和洗脫劑的選擇,、柱子的裝填質量有關,。
3、薄層色譜法
1）薄層色譜是比柱色譜更加應用廣泛的分離分析手段,。薄層色譜用于分離提純具有簡單快速的特點,，但是其分離容量不及柱色譜大，分離效果也不及柱色譜好,。
2）薄層分類：吸附與分配色譜
分配色譜又分正相色譜與反相色譜,。
正相：含水吸附劑（固定相），弱極性流動相,，極性小的移動快,。
反相：鈍化吸附劑（固定相），強極性流動相,，極性強的移動快,。
4、掃集共蒸餾法
1）原理：將試樣用注射器注入事先填入的無吸附性的填充劑（玻璃棉,、玻璃珠,、海砂等）的凈化柱內，在規(guī)定溫度下,，農藥和溶劑蒸汽隨氮氣流進冷凝管,，冷凝后進入接收器。脂肪,、色素不能汽化的雜質沉積在柱內填充劑上,，使雜質得以分離。
本法可用于有機磷,、有機氮農藥的分離提純,。
2）構成部件：柱溫箱,、溫度控制器、載氣流量控制器,、自動淋洗裝置,、凈化柱、冷凝管,、冷阱,、收集器。
5,、低溫冷凍分離法
1）食品中農藥殘留的分析,，取樣后殘留農藥與大量的脂肪、蠟質混合在一起,，給分離造成困難,。
2）由于動植物組織中的脂肪、蠟質可以在低溫下于丙酮溶液中生成沉淀,，將樣品用丙酮反復萃取,，萃取液經過冷凍，過濾而分離掉脂肪,、蠟質沉淀,，而農藥留在丙酮中,。
3）冷凍溫度一般在-70℃
6,、液相萃取法
1）原理：一組互不相溶的溶劑中溶有某一成分溶質。這種溶質以一定比例（濃度比）在兩相中分配,。兩相中分配比稱分配系數(shù),。利用同組溶劑中各物質分配系數(shù)不同或同種物質在不同溶劑組中分配系數(shù)不同而分開。（選擇合適溶劑,，反復分配）
2）適用農藥種類
a.用此法一次性回收率達60—100%的含氯農藥有：2,，4—滴甲酯劑，艾氏劑,、甲體六六六,、乙體六六六、丙體六六六,、丁體六六六,、硫丹、異狄氏劑,、七氯,、氯殺螨、丙菌清,、P,，P`—滴滴滴,、 P，P`—滴滴E,、O,， P`—滴滴銻、三氯殺螨醇,、狄氏劑,、環(huán)氧七氯、六氯苯,、碳氫靈,、甲氧滴滴銻
b.用上法回收的有機磷農藥有：谷硫磷、三硫磷,、地亞農,、氮線磷、乙拌磷,、殺蟲螟松,、亞胺硫磷、馬拉硫磷,、甲基一六零五,、一六零五、三九一一,、磷胺,、皮蠅硫磷
7、化學凈化法
1)殘留農藥提取液干擾分析成分很大程度是脂肪與色素,?；瘜W凈化法是使雜質與某種試劑發(fā)生化學反應除掉或者消擾。
2)最常用的化學凈化法是用酸處理對酸穩(wěn)定的農藥或用堿處理對堿穩(wěn)定的農藥來除雜,。
酸凈化：用濃H2SO4或濃H2SO4與發(fā)煙硫酸（1：1）混合液在分液漏斗中處理萃取液,，可以除脂肪、色素,。
除雜原理：不飽和脂肪,，色素中含有C=C，可以和濃H2SO4加成生,，成可溶于濃H2SO4的化合物而除去,。
堿凈化：用石油醚淋洗，而耐堿農藥有很好的回收率,。對艾氏劑,、狄氏劑、異狄氏劑宜用堿凈化,。
